ABSTRACT Introduction: Treponema pallidum is considered as a monomorphic bacterium with very few genomic differences among isolates and subspecies. The genetic diversity of this pathogen has not been explored in depth; however, this kind of studies potentially has a direct impact on the development of new diagnostic methods and vaccines. The objective of this work was to evaluate the genetic diversity of this pathogen in Cuba (2012-2019). Methods: Five exploratory studies were carried out based on molecular characterization, detection of one-off mutations and whole genome sequencing of T. pallidum. Results: The high level of genetic diversity of T. pallidum in the Cuban context was demonstrated by the detection of 8 subtypes of T. pallidum subsp. pallidum (TPA), 7 genotypes of TPA, the identification of T. pallidum subsp. endemicum in patients diagnosed with venereal syphilis, one-off mutations conferring resistance to macrolides with a high frequency and intra- and inter-strain recombination events in TPA. These findings suggest, as a conclusion, a significant genetic diversity of T. pallidum in the Cuban context with an increased predominance of recombinant genotypes over time, which should be further studied given their potential involvement in the development of this disease.

RESUMEN Introducción: Treponema pallidum es una bacteria monomórfica con muy pocas diferencias genómicas entre aislados y subespecies. La diversidad genética de este patógeno no ha sido explorada a profundidad, sin embargo, estos estudios impactan directamente en el desarrollo de nuevos métodos diagnósticos, vacunas, entre otros. El objetivo de este trabajo fue evaluar la diversidad genética de este patógeno en Cuba (2012-2019). Métodos: Se realizaron 5 estudios moleculares exploratorios basados en caracterización molecular, detección de mutaciones puntuales y secuenciación de genoma completo de T. pallidum. Resultados: Se determinó la presencia de 8 subtipos de T. pallidum subsp. pallidum (TPA), 7 genotipos de TPA, la presencia de T. pallidum subsp. endemicum en pacientes diagnosticados de sífilis venérea, con mutaciones puntuales de resistencia a macrólidos en una elevada frecuencia y eventos de recombinación intra e inter-aislados en TPA aportando significativamente a la diversidad genética de este patógeno en Cuba y en el mundo. Lo anterior, sugiere como conclusión una significativa diversidad genética de T. pallidum en el contexto cubano con un predominio incrementado en el tiempo de genotipos recombinantes, a los que se les debe seguir más de cerca por su potencial implicación en el comportamiento de esta enfermedad.

ABSTRACT Introduction: Mycoplasma genitalium is an emerging sexually transmitted pathogen. Preliminary studies conducted in Cuba, at the National Reference Laboratory of Mycoplasma at the Pedro Kourí Institute, demonstrated the circulation of genotypes resistant to macrolides and tetracyclines in clinical isolates in Vero cells. However, this methodology is laborious and long, which makes it unhelpful for the clinical management and treatment of patients. Aims: the aim of this study was the implementation of a rapid and sensitive molecular diagnostic tool based on Real Time PCR Mycoplasma genitalium antimicrobial susceptibility to macrolides to be determined, directly in clinical samples. Methods: This study implemented a rapid and sensitive molecular diagnostic tool based on Real Time PCR, which allows the presence of M. genitalium and its antimicrobial susceptibility to macrolides to be determined, directly in clinical samples, which decreases the time between diagnosis and treatment and permits the eradication of this microorganism in positive patients. This fact helps to cut the transmission chains of STIs caused by this bacterium, having a positive impact on the STI control program in Cuba. The results of the molecular method were corroborated by phenotypic tests of antimicrobial susceptibility of isolates in cell cultures, achieving a total coincidence between the result of the qPCR in the clinical sample and the corresponding isolates. Results: A substantial increase in macrolide resistance in M. genitalium was detected from 18% in 2014 to 98% in 2019, which has allowed health authorities to implement more accurate syndromic antimicrobial treatment protocols for STIs, contributing to better use of antibiotics in our country, in line with current WHO policies for the rational use of antimicrobials.

RESUMEN Introducción: Mycoplasma genitalium constituye un patógeno de transmisión sexual emergente. En estudios preliminares realizados en Cuba, en el Laboratorio Nacional de Referencia de Micoplasma en el Instituto Pedro Kourí, se demuestra la circulación de genotipos resistentes a macrólidos y a tetraciclinas en aislados clínicos en células Vero. Sin embargo, esta metodología es laboriosa y larga, lo cual lo hace poco útil para el manejo clínico y tratamiento de los pacientes. Objetivos: implementar una herramienta de diagnóstico molecular rápido y sensible basada en PCR en tiempo real, para determinar la susceptibilidad antimicrobiana a los macrólidos de M. genitalium, directamente en las muestras clínicas. Métodos: Se implementó una PCR en tiempo real que permite determinar la presencia de M. genitalium y su susceptibilidad antimicrobiana a los macrólidos, directamente en las muestras clínicas, lo que disminuye el tiempo entre el diagnóstico y el tratamiento y erradicación de este microorganismo en los pacientes positivos. Este hecho contribuye a cortar las cadenas de trasmisión de las ITS causadas por esta bacteria, incidiendo de forma positiva en el programa de control de las ITS en Cuba. Los resultados del método molecular fueron corroborados mediante el aislamiento en cultivos celulares y ensayos fenotípicos de susceptibilidad antimicrobiana, logrando una total coincidencia entre el resultado de la qPCR en la muestra clínicas y los aislados correspondientes. Resultados: Se detectó un incremento sustancial de la resistencia a macrólidos en M. genitalium desde un 18 % en 2014 hasta un 98 % en 2019, lo que han permitido a las autoridades sanitarias implementar protocolos de tratamiento sindrómicos antimicrobiano para las ITS más exactos, contribuyendo a un mejor uso de los antibióticos en nuestro país, en consonancias a las políticas actuales de la OMS para el uso racional de los antimicrobianos.

Objectives. Explore a new target for molecular diagnosis of Leishmania. Materials and methods. We evaluated the utility of the gene that encodes the heat shock protein 20-kDa (Hsp20) for detecting Leishmania by polymerase chain reaction (PCR). PCR was normalized and analytical parameters were determined, as well as the validity and diagnostic accuracy, and concordance with the PCR - 18S. PCR-Hsp20 with DNA was obtained from a group of clinical samples from different sources. Results. The analytical parameters were adequate. The sensitivity obtained was 86% and the specificity was 100%. The concordance with the reference method was good (κ = 0.731), which supports its potential use for diagnosis. The possibility of subsequent identification of the species by sequencing the amplified product gives an additional advantage. Conclusions. The usefulness of this gene as a new target for the detection of Leishmania was demonstrated. Because of its potential, it is recommended to improve the sensitivity of the method and to evaluate it in different endemic regions.

Objetivos. Explorar una nueva diana para el diagnóstico molecular de Leishmania. Materiales y métodos. Se evaluó la utilidad del gen que codifica la proteína de choque térmico de 20kDa (hsp20) para la detección de Leishmania por medio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).Se normalizó la PCR y se determinaron los parámetros analíticos, así como la validez y seguridad diagnóstica y la concordancia con la PCR-18S. Se evaluó la PCR-hsp20 con ADN obtenido de un grupo de muestras clínicas de distinta procedencia. Resultados. Los parámetros analíticos resultaron adecuados. La sensibilidad obtenida fue de 86% y la especificidad del 100%, la concordancia con el método de referencia resultó buena (κ = 0,731), lo que apoya su posible uso para el diagnóstico. La posibilidad de identificación posterior de la especie mediante secuenciación del producto amplificado le confiere una ventaja adicional. Conclusiones. Se demuestra la utilidad de este gen como una nueva diana para la detección del género Leishmania. Debido a su potencial, se recomienda mejorar la sensibilidad del procedimiento y realizar su evaluación en diversas regiones endémicas.

Objectives. Explore a new target for molecular diagnosis of Leishmania. Materials and methods. We evaluated the utility of the gene that encodes the heat shock protein 20-kDa (Hsp20) for detecting Leishmania by polymerase chain reaction (PCR). PCR was normalized and analytical parameters were determined, as well as the validity and diagnostic accuracy, and concordance with the PCR - 18S. PCR-Hsp20 with DNA was obtained from a group of clinical samples from different sources. Results. The analytical parameters were adequate. The sensitivity obtained was 86% and the specificity was 100%. The concordance with the reference method was good (κ = 0.731), which supports its potential use for diagnosis. The possibility of subsequent identification of the species by sequencing the amplified product gives an additional advantage. Conclusions. The usefulness of this gene as a new target for the detection of Leishmania was demonstrated. Because of its potential, it is recommended to improve the sensitivity of the method and to evaluate it in different endemic regions.

Objetivos. Explorar una nueva diana para el diagnóstico molecular de Leishmania. Materiales y métodos. Se evaluó la utilidad del gen que codifica la proteína de choque térmico de 20kDa (hsp20) para la detección de Leishmania por medio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).Se normalizó la PCR y se determinaron los parámetros analíticos, así como la validez y seguridad diagnóstica y la concordancia con la PCR-18S. Se evaluó la PCR-hsp20 con ADN obtenido de un grupo de muestras clínicas de distinta procedencia. Resultados. Los parámetros analíticos resultaron adecuados. La sensibilidad obtenida fue de 86% y la especificidad del 100%, la concordancia con el método de referencia resultó buena (κ = 0,731), lo que apoya su posible uso para el diagnóstico. La posibilidad de identificación posterior de la especie mediante secuenciación del producto amplificado le confiere una ventaja adicional. Conclusiones. Se demuestra la utilidad de este gen como una nueva diana para la detección del género Leishmania. Debido a su potencial, se recomienda mejorar la sensibilidad del procedimiento y realizar su evaluación en diversas regiones endémicas.

Introduction: leishmaniasis is a parasitic disease caused by several species of the genus Leishmania. The disease presents in a great variety of clinical forms. Psoriatic leishmaniasis has occasionally been reported among the cutaneous forms of the disease. Diagnostic certainty of the condition is indispensable, given the toxicity and side effects of the first line drugs used to treat it. Several methods are applied to reach an accurate diagnosis. These range from identification of the parasite in the tissue to detection of its DNA. Methods: data from a clinical case with suspected leishmaniasis were collected and analyzed. Various laboratory methods were applied to define the diagnosis, among them direct parasitological examination, histopathological examination, culture and polymerase chain reaction (PCR-18S and PCR-hsp70). Results and discussion: the tests performed to confirm the diagnosis of leishmaniasis were all negative. Histological examination diagnosed the dermatological lesion as psoriasis. Conclusions: very few cases of psoriatic leishmaniasis have been reported in the scientific literature. Comprehensive examination of the case by various methods ruled out the presence of leishmaniasis, allowing the application of the appropriate treatment and thus avoiding the inappropriate use of antimonials.

Introducción: la leishmaniasis es una enfermedad parasitaria causada por varias especies del género Leishmania, que se presenta en formas clínicas muy diversas. Entre las formas cutáneas, se ha notificado ocasionalmente la leishmaniasis psoriasiforme. Es imprescindible tener la certeza diagnóstica de leishmaniasis dada la toxicidad y los efectos colaterales que tienen las drogas de primera línea para tratarla. Se emplean varios métodos para llegar al diagnóstico, como son desde la identificación del parásito en el tejido hasta la detección de su ADN. Métodos: se realizó la recopilación y análisis de la información de un caso clínico con supuesta leishmaniasis, y se aplicaron distintos métodos de laboratorio para definir el diagnóstico, tales como examen parasitológico directo, examen histopatológico, cultivo y reacción en cadena de la polimerasa (PCR-18S y PCR-hsp70). Resultados y discusión: los exámenes realizados para confirmar el diagnóstico de leishmaniasis fueron negativos. Al estudio histológico, la lesión dermatológica se concluye como psoriasis. Conclusiones: aunque la literatura científica notifica casos de leishmaniasis de tipo psoriasiforme estos son escasos. El estudio integral del caso por diferentes métodos descartó la supuesta leishmaniasis en este paciente, lo cual permitió la aplicación del tratamiento adecuado y evitó el uso indebido de antimoniales para su tratamiento.

Introduction: there are in Cuba about 179 plants that the population uses as diurectics, but the effect of the majority of them has not been experimentally confirmed. Objective: to verify the pharmacological effect attributed to medicinal plants reported as diuretics, whose effect has not been validated yet. Methods: a two-phase ethnopharmacological study was conducted in Santa Clara municipality: ehnopharmacological identification and in vivo evaluation of the diuretic action of the most reported plants whose preclinical validation was not confirmed. The ethnopharmacological research study was developed in several places of the refered municipality, using a heterogenous sample made up of different sampling groups. On the basis of the two identified species that have not been experimentally validated, 30% decoctions were prepared and orally administered at a dose of 400 mg/kg, based on the determination of total solid content, to male albine rats weighing 170 to 210 g. The dose was completed with physiological saline solution to reach hydrosaline overload with constant total volume of administration equals to 40 mL/kg PV for both the treated groups and the controls (positive, furosemide at 20 mg/kg and hydrochlorotiazide at 10 mg/kg, and negative controls, 0.9 % sodium chloride). Excreted urine volumen were measured at half and hour, one hour, 2, 3, 4, 5 and 6 hours after the administration and the electrolyte concentrations in the total collected urine at 24 hours. Results: fourteen plants reported by the population were identified according to their use as diuretics. Ten of them presented with significant level of use over 30% whereas 2 lacked their effect validated (Caesalpinia bahamensis Lam. and Nectandra coriacea (Sw.) Griseb. It was observed that the groups treated with both plants increased the urine volume when compared to the negative control group; being the C. bahamensis action more remarkable. Conclusions: both plants had diuretic effect at 400 mg/kg dose. The action of C. bahamensis was very similar to that of furosemide, whereas the N. coriacea activity was more similar to that of tiazides.

Introducción: en Cuba se reportan alrededor de 179 plantas que la población utiliza como diuréticas, pero en la mayoría de los casos este efecto no ha sido comprobado experimentalmente. Objetivo: comprobar el efecto farmacológico atribuido a plantas medicinales reportadas como diuréticas que carecen de validación experimental. Métodos: se realizó un estudio etnofarmacológico en el municipio Santa Clara que contó con 2 etapas: identificación etnofarmacológica y evaluación in vivo de la actividad diurética de las plantas más reportadas que carecían de validación preclínica. La investigación etnofarmacológica se desarrolló en varias localidades del referido municipio, utilizando una muestra heterogénea conformada por diferentes grupos muestrales. A partir de las dos especies identificadas que carecían de validación experimental, se elaboraron decocciones al 30 % y se administraron por vía oral a la dosis de 400 mg/kg, sobre la base de la determinación de los sólidos totales, a ratas albinas machos con un peso comprendido entre 170 y 210 g. La dosis fue completada con solución salina fisiológica para lograr una sobrecarga hidrosalina con un volumen total de administración constante de 40 mL/kg PV, tanto para los grupos tratados como para los controles (positivo, furosemida 20 mg/kg e hidroclorotiazida 10 mg/kg; negativo, cloruro de sodio 0,9 %). Se midieron los volúmenes de orina excretados a las ½, 1, 2, 3, 4, 5 y 6 h posadministración y las concentraciones de electrolitos (Na+ y K+) en la orina total colectada a las 24 h. Resultados: se identificaron 14 plantas reportadas por la población atendiendo a su uso como diurético, de ellas 10 especies presentaron un nivel de uso significativo superior a 30 % y 2 carecían de validación del efecto (Caesalpinia bahamensis Lam. y Nectandra coriacea (Sw.) Griseb. Se observó que los grupos tratados con ambas plantas incrementaron el volumen de orina en relación con el grupo control negativo, la acción de C. bahamensis resultó más marcada. Conclusiones: ambas plantas presentaron efecto diurético a la dosis de 400 mg/kg. La acción de C. bahamensis fue muy similar a la furosemida, mientras que la acción de N. coriacea resultó más parecida a las tiazidas.

The case report of a 60 year-old patient who suffered from blunt traumatic injuries and no fractures in the pelvis, hips and both thighs, due to an automobile accident in 1984 is described. He was surgically treated in "Dr. Juan Bruno Zayas Alfonso" Teaching General Hospital in Santiago de Cuba as he presented a Morell-Lavalle serous effusion. He had the total exeresis of a giant recurrent cystic mass in two surgical times. The patient had a satisfactory clinical course and in 2010 he is still asymptomatic.

Se describe el caso clínico de un paciente de 60 años de edad, que en 1984 sufrió lesiones traumáticas cerradas y sin fracturas, en la pelvis, caderas y ambos muslos, como consecuencia de un accidente de tránsito, el cual fue operado en el Hospital General Docente "Dr. Juan Bruno Zayas Alfonso" de Santiago de Cuba por presentar derrame seroso de Morell-Lavalle, por esta causa. Se realizó exéresis total de una masa quística gigante recurrente en dos tiempos quirúrgicos. El anciano evolucionó satisfactoriamente y todavía en el 2010 se mantiene asintomático.

The spraying dehydration conditions of a Papaic hydrolisate from an animal muscle were studied, and it was proved that the parameter with the highest direct influence on the apparent density of the powder was the concentration of total solids (43 %), followed by the temperature at the inlet of the chamber (140 °C) and the speed of the atomizer (21 500 rev/min), both in an inverse form. The apparent density reached approximately 400 kg m-3 compared with the obtained before the study of 50 kg m-3. As to the apparent density, better results were obtained on dehydrating the hidrolisate at 122 °C in the inlet of the machine and at 90 °C in the outlet, in comparison with 140 °C in the inlet of the equipment. It was proved that the product obtained had physical, chemical and biochemical characteristics that favored the growth of different microbial species of collection

Se estudiaron las condiciones de la deshidratación por aspersión de un hidrolizado papaínico proveniente del músculo animal, y se demostró que el parámetro de mayor influencia directa sobre la densidad aparente del polvo resultó la concentración de sólidos totales (43 %), seguidamente de la temperatura en la entrada de la cámara (140 °C) y velocidad del atomizador (21 500 rev/min), ambos de forma inversa. La densidad aparente alcanzó aproximadamente 400 kg m-3 en comparación con la obtenida antes del estudio de 50 kg m-3. Se comprobó que mejores resultados, en cuanto a la densidad aparente, se obtuvieron al deshidratar el hidrolizado a 122 °C en la entrada de la máquina y 90 °C en la salida en comparación con 140 °C en la entrada del equipo. Se demostró que el producto obtenido posee características físico-químicas y bioquímicas favorecedoras del crecimiento de diferentes especies microbianas de colección

The non-treponemic fast detection test of plasmatic reagines (RPR) and the treponemic hemagglutination test of Treponema pallidum were used in the detection of infection due to T. pallidum in 60 males presenting HIV/AIDS infection with clinicoepidemiological diagnosis of syphilis. It was confirmed that 30 % presented recently acquired symptomatic or latent syphilis and that 10 % had markers of past treated infection or of late acquired latent syphilis, whereas in the other 60 % no serological reactivity was detected. . A seroprevalence study of reaginic antibodies was conducted by RPR in 59 HIV/AIDS females, using 67 women negative to this virus as controls. All of them had no symptoms compatible with the syphilitic infection. It was concluded that 20.3 % and 11.9 %, respectively, presented reactivity, which established a probable diagnosis of syphilis or a seroresistance to a previouos syphilis. These results showed a close association between syphilis and HIV/AIDS and that both diseases may coexist in a same patient.

Se utilizó la prueba no treponémica de detección rápida de reaginas plasmáticas y la prueba treponémica de hemaglutinación de Treponema pallidum, en la detección de la infección por T. pallidum en 60 hombres que presentaban la infección VIH/SIDA con diagnóstico clínico-epidemiológico de sífilis. Se confirmó que 30 % presentaba sífilis reciente adquirida sintomática o latente y que 10 % poseía marcadores de infección pasada tratada o de sífilis tardía adquirida latente, mientras que en 60 % restante no se detectó reactividad serológica. Se realizó, además, un estudio de seroprevalencia de anticuerpos reagínicos por detección rápida de reaginas plasmáticas en 59 mujeres con VIH/SIDA, utilizando como control 67 mujeres negativas a este virus, todas sin síntomas compatibles con la infección sifilítica. Se obtuvo que 20,3 y 11,9 %, respectivamente, mostraban reactividad, lo que estableció un diagnóstico probable de sífilis o una serorresitencia a una sífilis anterior. Estos resultados muestran una fuerte asociación entre sífilis y VIH/SIDA y que ambas enfermedades pueden coexistir en un mismo paciente.

Even when there is not direct relation between psoriasis and AIDS, there have been reported impressive manifestations of psoriasis in AIDS diagnosis, difficulties in response to therapy, increase of serious forms of the disease, and clearing of lesions in terminal phase of AIDS. Two cases in which the two diseases are associated were presented. Both cases had outbreaking psoriasis guttata, one of them after being diagnosed with AIDS, in addition to have other dermatosis such as leukoplasia and ungual candidiasis; and the two patients also had scabies. Additionally, presentation of generalized lesions resistant to prescribed therapies was observed.

Aunque no existe una relación directa psoriasis-SIDA se ha notificado :manifestación impresionante de la psoriasis en el diagnóstico de SIDA, dificultad en la respuesta terapéutica, aumento de las formas graves de la enfermedad y aclaramiento de las lesiones en la fase terminal del SIDA. Se mostraron 2 casos donde se asocian las dos enfermedades. Ambos casos presentaron psoriasis guttata en brote, uno de ellos comenzó posterior al diagnóstico del virus de inmunodeficiencia humana, que además presentó otras dermatosis como: leucoplasia, candidiasis ungueal y los 2 casos presentaron escabiosis. Se observó, además, una tendencia a la presentación de lesiones generalizadas y resistentes a las terapéuticas indicadas.